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点击次数：5456 发布时间：2016/12/27 9:17:39
elisa试剂盒是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。操作中的各个环节都会影响试验的检测质量，而洗板也会影响到试验的质量。
洗板可能碰到的问题有：
1.采用手工洗板，孔与孔之间液体交叉；
2.采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差；
3.反应板过多造成洗板等待时间长。
相应解决办法有：
1.保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2.合理安排，或多用几台洗板机。
那么洗板的目的是什么？
在于将特异性结合于固相上的抗原（抗体）与温育过程中吸附的非特异性成份分离，使免疫复合物与待测抗体（抗原）呈一定比例，洗板是否合格直接影响检测结果的准确性。洗板应严格按照说明控制洗板时间及洗板次数，ELISA 检测一般用洗涤液洗板3 次，洗涤液应严格按照操作说明进行稀释， 洗液应注满每个微孔并注意洗液不外溢，垂直甩板避免交叉污染，防止出现假阴性及假阳性结果。使用洗板机洗板可一定程度上避免环境污染、提高工作效率，洗涤开始时注意观察每根吸液针是否一直插入孔底并吸干孔内全部液体， 严格按照要求设置一定的洗板时间及洗板次数。洗板过程中注意冲力大小，避免冲力过大导致酶结合物丢失，吸光度值偏低。洗液应根据不同厂家的酶标板调整注水量， 注意不要溢出孔外； 稀释洗液所用的蒸馏水或去离子水酸碱度适中，使配出的洗液pH 在7.2~7.6 范围内，用非金属容器保存，保持液体新鲜无污染、沉淀。洗板结束后将板拍干，应垂直扣在备好的干净的吸水纸或毛巾上，且注意每次更新干净的吸水纸或毛巾。
洗板时应注意以下问题：
（1） 需每天校正注液量及残液量， 洗涤后残液量不得大于2μl；
（2）及时更换破损吸液针，避免破坏底板包被；
（3）针对不同厂家酶标板注意调整吸液头下降高度， 避免冲洗针头卡住酶标板；
（4）注意调整洗液量，洗液量过多将溢出，过少将达不到洗涤效果；
（5）关机前使用蒸馏水冲洗管道，避免洗液的结晶物堵塞管道；
（6）不同种试剂盒的洗液严禁混合使用。
原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司
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