elisa试剂盒可用于测定抗原，也可用于测定抗体。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，搅扰小能够测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。在这种测定办法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶符号的抗原或抗体，③酶效果的底物。
ELISA试剂盒操作步骤
ELISA试剂盒运用前，将一切试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。
依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。
参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素符号的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。ELISA试剂盒重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。
取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。
在450nm波利益测定各孔的OD值。
依据ELISA试剂盒试剂的来历和标本的性状以及检查的具备条件，可规划出各种不同类型的检查办法。
（一）双抗体夹心法
（二）双位点一步法
（三）间接法测抗体
（四）竞争法
（五）捕获法测IgM抗体
（六）使用亲和素和生物素
ELISA试剂盒遍及用作非放射性同位素的成键化验. 在这种办法中, 一般规范配体是固定的, 经过参加溶液相受体或蛋白质来使之成键. ELISA试剂盒经过参加与受体特异性反响的抗体来定量成键的受体, 而且开始抗体的量以参加第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的结尾, 在其结尾的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反响, 从而使溶液显色。
原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司
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