主营产品:

ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、生物试剂、抗体、血清、进口标准品、微生物培养基
服务热线:

13636351217

联系我们/CONTACT US

联系人:钱经理

电 话:13636351217

手 机:13636351217,13636351073

地 址:上海市松江临港科技城汉桥文化科技园B座

邮 编:201615

传 真:021-64881400

邮 箱:2881726255@qq.com

阿仪网商铺:http://www.app17.com/c60514/

手机网站:m.shhyswkj.com

技术文章

ELISA试剂盒试验前做好对照很首要

点击次数:758   发布时间:2019/12/30 9:37:39

    elisa试剂盒试验固相载体的选择:很多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。

    包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,恳求纯度要好,吸附时通常恳求PH在9.0~9.6之间。

    吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,通常多选用4℃ 18~24小时。

    有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应留心防护。

    其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。

    如今常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。

    不管何种载体,在运用前均可进行选择:用等量抗原包被,在同一试验条件下进行反应,查询其显色反应是不是均一性,据此判明其吸附功能是不是出色。

    正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证试验作用的性。

    ELISA试剂盒试验条件的选择

    在ELISA中,进行各项试验条件的选择是很首要的,其间包括:

    有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是如今较为满意的供氢体。

    底物作用一段时间后,应参与强酸或强碱以中止反应。

    通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。

    底物运用液有必要新鲜制造,尤其是H2O2在临用前参与。

    然后再固定其它条件或采纳“方阵法”(包被物、待检样品的参看品及酶符号抗体分别为不一样的稀释度)在正式试验系统里地滴定其工作浓度。

    有时本底较高,说明有非特异性反应,可选用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

    酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择恳求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。

    蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不一样的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相一起,查询阳性标本的OD值。

    选择OD值大而蛋白量少的浓度。关于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

    ELISA试剂盒试验酶符号抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行开始效价的滴定(见酶符号抗体部份)。

原创作者:上海恒远生物技术发展有限公司

首 页| 公司介绍| 产品展示| 公司新闻| 技术文章| 联系我们| 客户留言

阿仪网 设计制作,未经允许翻录必究. 联系人:钱经理 联系电话:13636351217 ICP备案号:沪ICP备11004148号-11 总访问量:8422205 管理登录

主营产品:ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、生物试剂、抗体、血清、进口标准品、微生物培养基

扫一扫,关注我们!