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鲎试剂的试验方法

阅读次数:806   发布时间:2022/11/1 10:12:45

鲎的身上流淌着一种十分珍奇的血液。这种血液是淡蓝色的。这种淡蓝色的血液中含铜量很高,而且一遇到细菌就会凝固。利用鲎血液的这种特殊反应,对它进行处理,可以制成一种特殊的检验试剂--"鲎试剂"。鲎试剂可以准确、快速地检测人体内部组织是否因细菌感染而致病;在制药和食品工业中,也可用它对毒素污染进行监测。
 
凝集反应的原理来定性检测或半定量浊度法和显色基质法。则鲎试剂可分为:凝胶法鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂和终点显色法鲎试剂。凝胶法鲎试剂通过与内毒素细菌内毒素检查法包括两种方法,即凝胶法和光度测定法,后者又包括产生内毒素的方法。动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂和终点显色法鲎试剂则都是定量检测内毒素的。
  
选择合适的操作方法与顺序,在鲎试剂的使用过程中尤为重要。在操作过程中要注意以下几点:
(1) 实验室要求洁净、无尘埃流通;检验人员同时注意卫生的保持。在整个使用操作过程中应防止微生物的污染,例如空气的流动,人员的口沫、汗液污染等。
安瓿外瓶壁脏物、瓶壁碎片、砂轮(2) 鲎试剂开启、溶解和配制时应尽量避免将锯屑等异物混入鲎试剂中,避免鲎试剂外损。
(3) 鲎试剂中含有多种蛋白质,用力振摇会产生气泡,一旦起泡难以消除,而影响检测的准确性,所以在整个操作过程中都要轻力以避免因过分震动而引起的误差。
(4) 量取和加样反应物时,一定要加到试管底部接近鲎试液而不接触鲎试液的管壁处。
缓冲能力较强或偏酸、碱的供试品,应考虑供试品的pH值。氯化钠注射液葡萄糖注射液(5) 生成凝胶的适pH值为6~8,对于(5%,10%)等注射液,不需考虑供试液的pH值,而检查其他制剂时,尤其是一些本身
内毒素及样品混合液中时反应已开始,并在一定的温度范围内,反应温度越高,反应速率越大;保温时间的增长,也会提高鲎试剂的灵敏度,增加假阳性的发生,导致较大误差。因此,要注意控制温度的变化和保温时间。(6) 使用时要严格控制温度和时间。当鲎试剂一加入
干热灭菌处理,待烤箱温度升至设定的温度后开始计时,干烤至少1h。也可用其他经确证不干扰细菌内毒素(7) 保持实验器具的洁净。每次检验完毕,应及时将玻璃器具充分清洗后于250℃的检查的适宜方法。对于塑料、橡胶等不耐热器材可用30%双氧水浸泡4h,用无热原水冲洗,70℃干燥备用。
 
鲎试剂的贮存
检验误差虽然冻干的鲎试剂在常温条件下是相对稳定的,但还是应存放在2℃~8℃下,避免长时间放置在高于25℃的温度条件下导致因贮藏不当、质量下降而引起的

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