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公司新闻

脂蛋白的分离

阅读次数:1610   发布时间:2012/9/10 9:01:42

昆虫有一个开放的循环系统血液可以简单地通过一个切口在身体*方便的你应把一条腿让血滴到冷的玻璃烧杯以获得的收益这是必要的,排除血液注入缓冲进入体腔实验过程是下图所示

搬迁后的血细胞,溴化钾添加到形成44%个解决方案这是分层与磷酸盐缓冲液(公共广播公司形成一个密度梯度离心*终所有的蛋白质上浮或下沉的区域对应的密度有一个低密度脂蛋白黄色漂浮高于non-lipoproteins包括绿色cyanoprotein分离蛋白是分离对个人的分数密度是由折射率,蛋白质含量和组成Brad ford法和电泳分别脂质成分可以分析薄层和气相色谱法

实验议定书

1天出血和离心

2天分馏折射率和透析

3天冻干

1天:出血和离心

注意:你需要戴上手套,整个程序

每一需要10 - 15蝗虫

1。2 - 5毫升的公共电视网在一个干净的100毫升烧杯和添加25µ升200毫米磺酰氟

注意安全。剧毒的

2。流血蝗虫持有所有的腿和翅膀一条腿靠近胸部见图片)确保没有昆虫的唾液进烧杯已经准备好纸巾口水)

3。轻轻注入几百微升通过部分皮下

不要伤害肠道

4。冲洗胡萝卜素仔细进行挤压胸腔部位轻轻收集血液从10 - 12蝗虫

5。流血蝗虫在罐子里完成了出血,movet罐子的电冰箱处理过动物尸体在稍后的日期

6。使解决~ 15毫升与公共电视网

7。添加8.9克溴化钾晶体,轻轻地搅拌,用干净的搅拌棒

8。溶解部分转移到50毫升量筒和添加更多2 - 3毫升)公共广播溶解溴化钾搅拌至溶解游泳池这些解决方案,高达20毫升搅拌进一步测量筒

9。转移30毫升塑料注射器由夹子连接到18针针和毛细管见图片)

10。流进热密封的离心管

11。另加20毫升注射器进入覆盖的

12。又热封口温暖起来

13。平衡样本来自其他组必须精确分析天平、添加或删除公共电视网或从如果液体是在脖子上去除尖端组织

14。金属帽的密封的热封口机一旦上限达到管的肩膀快速移动的权利和与散热片

15。将四积分50转子相对位置和地点,超速离心机转子

16。确保盖关闭打开真空离心机设置运行的条件10℃刹车45000时间4.5 h。

17。旋转45000转为4.5小时留样一夜之间在离心机的。

2天:检索样本

(约2 - 3小时连续

1。运行后结束真空等到压力达到大气压力现在您可以删除

2。注意任何不寻常的观察期间或之后,法离心(例如泄漏)并记录在离心机的书清洁室和转子并开始排练避免凝结在离心机

3。用一把锋利的单刃剃刀仔细剪开离心管

4。建立biorad馏分收集器内容20毫升的组分分馏

5。确定密度使用折射计

6。同时测定紫外吸光度在280纳米记得使用uv-permeable塑料试管(1对)

7。确定的折射率发生2透析管每个约20厘米长)到500毫升的烧杯中充满了

8。离开一个整除(300µ升)每一部分标记修改离心透析

9。透析~ 1升水在寒冷的房间,改变缓冲区的一次

10。小心将整体携脂组分(通常是3 - 5黄色分数)进入透析管关闭了在底部有一个橙色钳)使用巴斯德吸管

11。关闭透析确保留下足够的扩展空间,在透析

12。透析4升水在寒冷房间里过夜改变水和重复拨号

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