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阅读次数:1293 发布时间:2012/10/8 10:00:21
考马斯亮蓝染色:(凝胶)
1)结合225毫升甲醇225毫升ddh2o。
2)加0.5克考马斯亮蓝。
3)使用前,加入50毫升乙酸终浓度10%。
4)染色2小时。染色时间可以缩短50秒微波;~中等功率。
5)染色后,倒出滤入瓶标使用的染色。染色可重复使用一次,但新鲜10%醋酸必须添加)。
考马斯亮蓝脱色:(凝胶)
1)结合25毫升甲醇437.5毫升ddh2o。
2)使用前,加入37.5毫升乙酸终浓度7.5%。
3)脱色,加海绵(件泡沫包装)几个小时。它可能需要使用一个以上的变化退色。微波可以用在这个阶段,但细节尚未确定。
考马斯亮蓝染色:(膜)
1)结合50毫升甲醇50毫升ddh2o。
2)加0.1克,考马斯亮蓝。
3)染色浇足够数量的膜覆盖在培养皿。
4)清洗液轻轻来回膜。让它浸泡一两分钟。
5)处理染色方式相似,为凝胶染色。
透析管准备
1)切管适当的长度和发生在一个大烧杯。
2)加上足够的5%碳酸氢钠(添加50克每升ddh2o)覆盖管。
3)煮滚,让它煮15分钟。油管浮地方烧杯内下一个较小的尺寸上的油管。
4)冲洗管与过量的ddh2o。
5)浸泡在管2毫米四乙酸(加10毫升0.2米1升的ddh2o)一个小时。
6)再次冲洗与过量的ddh2o。
7)存放在0.05%叠(加0.005毫升每公升ddh2o)。
倒堆叠凝胶…
0.4mls丙烯酰胺
0.4mls 10电泳缓冲液
40uls 10%十二烷基硫酸钠
3.12mls ddh20
2uls定时
34uls黄芪多糖
如何使15%小型凝胶
* * * *的重要原因,丙烯酰胺是被使用,它是非常重要的,戴上手套,整个程序。
1)测量出5.152-ml ddh2o到无菌15-ml-tube。
2)加4.58-ml丙烯酰胺。
3)下添加1.1-ml 10分离缓冲液。
4)添加110毫升10%十二烷基硫酸钠。
5)继续加入56-ml黄芪多糖。
6)*后,添加5.6-ml定时。(注:定时的聚合剂,以下步骤必须做得相当迅速。)
7)使用一次性吸管,同质化的解决方案,以免造成任何气泡。
8)使用相同的吸管填充玻璃留下约1英寸的顶部。
9)*后,加入0.5英寸的水饱和正丁醇在顶部的凝胶。注:离开未使用部分的解决方案在15毫升管。使用此确定如果你的凝胶准备使用(当管聚合,所以是你的凝胶)。