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公司新闻

LB培养基中抗生素的贮液配置和工作液浓度

阅读次数:4406   发布时间:2014/2/19 8:58:43

LB培养基是分子生物学中*常用的一种培养基,用于细菌培养。本公司所生产的LB培养基原料,NaCl为国产分析纯,胰化蛋白胨及酵母粉为进口OXOID。经充分混匀所得。

①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22 μm滤器过滤除菌;
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌;
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

注意:镁离子是四环素的拮抗剂。对于以四环素为筛选抗性的细菌,应使用不含镁离子的培养基,如LB培养基。

下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度

氨苄青霉素:贮液浓度   50 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作浓度 20 μg/ml (严紧型质粒) 60 μg/ml (松弛型质粒)
羧苄青霉素:贮液浓度   50 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作浓度 20 μg/ml (严紧型质粒) 60 μg/ml (松弛型质粒)
氯霉素:贮液浓度   34 mg/ml  溶于乙醇  -20℃保存  工作浓度 25 μg/ml (严紧型质粒) 170 μg/ml (松弛型质粒)
卡那霉素:贮液浓度   10 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒)
链霉素:贮液浓度   50 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒)
四环素: 贮液浓度   5 mg/ml  溶于乙醇  -20℃保存  工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒)

质粒类型:

DNA construct

Origin of Replication

Copy number

Classification

Plasmids

 

 

 

pUC vectors

pMB1*

500–700

high copy

pBluescript? vectors

ColE1

300–500

high copy

pGEM? vectors

pMB1*

300–400

high copy

pTZ vectors

pMB1*

>1000

high copy

pBR322 and derivatives

pMB1*

15–20

low copy

pACYC and derivatives

p15A

10–12

low copy

pSC101 and derivatives

pSC101

~5

very low copy

Cosmids

 

 

 

SuperCos

pMB1*

10-20

low copy

pWE15

ColE1

10-20

low copy

 

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