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阅读次数:4406 发布时间:2014/2/19 8:58:43
LB培养基是分子生物学中*常用的一种培养基,用于细菌培养。本公司所生产的LB培养基原料,NaCl为国产分析纯,胰化蛋白胨及酵母粉为进口OXOID。经充分混匀所得。
①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22 μm滤器过滤除菌;
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌;
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。
注意:镁离子是四环素的拮抗剂。对于以四环素为筛选抗性的细菌,应使用不含镁离子的培养基,如LB培养基。
下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度
氨苄青霉素:贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 20 μg/ml (严紧型质粒) 60 μg/ml (松弛型质粒)
羧苄青霉素:贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 20 μg/ml (严紧型质粒) 60 μg/ml (松弛型质粒)
氯霉素:贮液浓度 34 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存 工作浓度 25 μg/ml (严紧型质粒) 170 μg/ml (松弛型质粒)
卡那霉素:贮液浓度 10 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒)
链霉素:贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存 工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒)
四环素: 贮液浓度 5 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存 工作浓度 10 μg/ml (严紧型质粒) 50 μg/ml (松弛型质粒)
质粒类型:
DNA construct | Origin of Replication | Copy number | Classification |
Plasmids | | | |
pUC vectors | pMB1* | 500–700 | high copy |
pBluescript? vectors | ColE1 | 300–500 | high copy |
pGEM? vectors | pMB1* | 300–400 | high copy |
pTZ vectors | pMB1* | >1000 | high copy |
pBR322 and derivatives | pMB1* | 15–20 | low copy |
pACYC and derivatives | p15A | 10–12 | low copy |
pSC101 and derivatives | pSC101 | ~5 | very low copy |
Cosmids | | | |
SuperCos | pMB1* | 10-20 | low copy |
pWE15 | ColE1 | 10-20 | low copy |