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阅读次数:1133 发布时间:2014/4/22 9:17:21
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(*小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。
支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似,但微绒毛电子密度比支原体小,且中央无颗粒群或中央束。
支原体代谢需固醇类物质、部分种类需要精氨酸、O 2或葡萄糖,每一种支原体都有自身持点。多数支原体适合于偏碱条件下生存(PH7.6—8.0),对酸耐受性差。对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。
支原体污染细胞后。培养液可不发生混浊。多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解。因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢。甚至从培养器皿脱落。
支原体检测方法:
1、相差显微镜检测;2、低张处理地衣红染色观察; 3、DNA荧光染色法;4、电镜检测;5、3-H胸腺嘧啶掺入法; 6、聚合酶链反映法; 7、免疫学方法; 8 、支原体的培养。
对于支原体污染的细胞,可以采取补救措施:
1、抗生素排除法:可以用5-10倍于常用量的冲击法,加入高浓度抗生素后作用24-48小时,再换入常规培养液,有时可能有效。推荐用量:庆大霉素 200ug/ml ,四环素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。对于支原体污染抗生素应用,预防性应用比污染后使用好。
2、 加温除菌:根据支原体耐热性能差的特点。将受支原体污染的细胞置于41度中作用5-10小时可以杀灭支原体。但由于41度对培养细胞本身也有较大的影响,故处理前,应行预试验,确定出限度杀伤支原体而对细胞影响较小的处理时间。